基质效应对临床样本结果的干扰
发布日期    :
2024-01-26
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目前临床上常用室间质量评价(EQA)和能力对比分析(PT)来评价和监测实验室检测结果的准确性 ,但是实验数据表明  ,在分析某些项目时  ,许多室间质控材料均存在明显的基质效应    ,故此时的EQA/PT成绩并不能客观地反映该实验室检测结果的准确性     ,因此临床及实验室标准化协会(CLSI)颁发了EPl4A文件用于评价质控材料的基质效应    。


基质效应对临床样本结果的干扰



01

什么是基质效应 ?








基质效应是指“样本中除分析物以外,所有其他成份所介导的分析误差”,影响分析物定量测定的准确性  。“基质效应”是一个很广泛的概念,它几乎存在于所有样本中,当你想要测定样本中任何一个分析物时,都不可避免地要受到“周围物质”的影响  。按Robert Rej的观察,基质效应是来自于生物标本中未知的或性质不明的物质或特性(Properties,如黏度,表面张力,蒸汽压,pH)所引起干扰 。
对于临床实验室来说,首要目的是要准确地测定病人标本。因此,厂家在仪器与试剂的研制过程中和在方法学的选择过程中,是以病人的新鲜血清标本作为“最佳”的检测对象  。此时,测定系统对新鲜血清标本而言不考虑基质效应,也就是说,认定该测定系统对新鲜血清标本的基质效应接近于零。当测定质控血清或校准品时,由于质控血清和校准品是经过加工处理过的,因此它的反应特性不同于新鲜血清标本的反应特性,使测定结果出现偏差 。这就是基质效应。这种由于基质效应引起测定结果的偏差又称为基质偏差(matrixbias)  。
基质效应对方法的检出限(LOD) 、线性  、准确度和精密度会产生严重的影响 ,在校准品和质控品的开发过程中应尽量减小或控制基质效应的影响。








02

基质效应的特性








多变性   :
同一基质状态的基质效应因检测方法和检测条件而异。
确定性:
只要是经过处理的样品(参考物 ,校准品   ,质控品)与临床样本的基质不一致,就会产生基质效应  。
相对性:
并不是所有的基质效应都是不可接受的   ,某些检测系统的基质效应可以忽略不计    ,或者基质效应引入的误差在可接受范围内。








03

基质效应的产生原因及控制方法






1. 仪器的设计



仪器的设计与分辨率是造成基质效应的一个重要因素     。高性能高分辨率能在一定程度上排除基质效应的影响。仪器设计中与基质效应有关的因素有样品,样品空白,(酶活性测定时)加热单元的稳定性,吸样系统的精确度,试剂/样品的携带污染,分光光度计分辨率,自动化程度及分析后数据处理方式等也是产生基质效应的重要因素 。上述因素可以解释,为什么有些自动分析仪对参考物或质控物表现出较小的基质效应,而另一些自动分析仪则表现出较明显的基质效应 。


2. 试剂的组成成分



试剂成分中,工具酶的来源(微生物源性或动物源性),浓度和纯度等影响检测特异性和检测结果 。以酶法测定胆固醇的试剂为例,不同来源的胆固醇酯酶(微生物源性和胰原性)对长链脂肪酸胆固醇酯的水解效率不一样,例如胆甾烯基花生四烯酸在动物源性血清中含量很高,而在人血清中含量很低,从而造成质控血清中或病人血清中胆固醇酯水解效率的差别      。Wiebe和Bernet发现一种微生物源性的胆固醇酯酶(BoehringerMannheimDiagnostics)和动物胰源性的胆固醇酯酶(DowDiagnostics)对胆固醇酯(包括胆甾烯基花生四烯酸)水解效率几乎相同  。所以,若在参考物中添加的是非人源性胆固醇酯,用不同酶法试剂盒测定时可能会产生基质效应   。


3. 分析方法的特异性



基质效应与分析方法缺乏特异性有关 。特异性的IFCC定义:一种分析方法能单独地测定出目标分析物的能力。如果,分析方法的特异性差,那么基质中与目标分析物相似的一些物质也同时被测定出 。病人血清标本有时也会遇到异常特性(Attribute,属性或特性),例如,总蛋白浓度异常,药物,或浊度等。因此,对临床标本的处理和稀释必须仔细规定。
方法学不同对基质效应的敏感性不同 。有些测定方法对基质效应不敏感;有些测定方法对基质效应很敏感,例如,胆固醇和胆红质测定,需要用人血清型校准液。Doumas BT报道用胆红质氧化酶测定结合胆红质时,一定要用人血清配制的校准液   。使用人白蛋白配制的校准液,测定结果有差异;用牛白蛋白配制的校准液,测定结果差异更大  。因此,在选择用于临床测定方法时,应选择那些对参考品的基质效应不敏感的方法,这对用参考品来评价准确度时尤为重要。


4. 参考物或质控物的组成



检验科日常的主要测定物是病人新鲜血浆或血清,测定方法的最佳条件就是依据新鲜血浆或血清而建立的 。所以,理想的质控血清应该和实验室所用的临床标本的反应特性相一致(如用新鲜的,非冻干血清 、血浆或全血的参考品)  。当测定参考物或质控物时 ,由于它们经过加工处理,如冷冻干燥、添加稳定剂和某些分析物等 ,与日常检验的病人样本的基质不同  ,会产生基质效应 。
在酶的质量控制中,酶的参考品(血清)中所含酶的来源,最好是人源性的酶,或者所用酶的催化行为应接近于人血清中酶的催化行为。就是说参考品或质控物中酶的催化行为与临床标本中酶的催化行为之间的差异越小,基质效应就越小,那么这种参考物或质控物的“可通用性或可兼容性”就越大 。否则,就会出现测定误差  。












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